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默瑞生物TwistDx試劑盒又來現貨了,需要訂購的請速速聯系我們小瑞

發(fā)布時間: 2020-03-20  點擊次數: 2028次

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 一個月內,學術期刊連發(fā)兩篇論文!上半年引爆生物圈的華人科學家張鋒教授團隊又有新動作!這次,他在一月內,分別在《Nature》、《Science連發(fā)兩篇論文!他將CRISPR-Cas13a改造成了靈敏度達到了阿摩爾級(aM,10的負18次方摩爾每升),可以檢測單分子的SHERLOCK技術。而這其中,RPA起到了不小的作用。

那么,什么是RPA呢?

RPA,即重組酶聚合酶擴增技術,是在由多種酶和蛋白的參與下,在恒溫條件下實現核酸指數擴增的技術,被稱為是可以替代PCR的核酸檢測技術。

RPA技術主要依賴于三種酶:能結合單鏈核酸(寡核苷酸引物)的重組酶、單鏈DNA結合蛋白(SSB)和鏈置換DNA聚合酶。這三種酶的混合物在常溫下也有活性,反應溫度在37°C左右。

RPA的反應原理

RPA的反應過程,首先是重組酶與引物結合,形成蛋白-DNA復合物。接著在dsDNA中尋找同源序列。一旦引物定位了同源序列,就會發(fā)生鏈交換反應形成并啟動DNA合成,對模板上的目標區(qū)域進行指數式擴增。而被替換的DNA鏈與SSB單鏈DNA結合蛋白結合,防止進一步被替換。在這個體系中,由兩個相對的引物起始一個合成事件。整個過程進行得非??欤话憧稍谑昼娭畠全@得可檢出水平的擴增產物。

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RPA與相關技術的比較

與PCR實驗相比,RPA實驗能在恒定溫度下進行全程實驗,沒有復雜的操作,對儀器及人員的要求不高,適合基層或現場快速診斷。

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而另一種新興技術,LAMP (Loop-mediated isothermal amplification),中文名為“環(huán)介導等溫擴增反應”,由于其簡便的操作,也被視為PCR技術強有力的競爭者。在此,讓我們對比下LAMP與RPA兩種試劑盒進行的實驗:

 

LAMP(環(huán)介導等溫擴增)試劑盒

RPA試劑盒

主要組分

鏈置換DNA聚合酶

重組酶;單鏈結合蛋白;鏈置換DNA聚合酶

適反應溫度

60-65

37-40

推薦反應時間

40min左右

20min左右

引物數

2

1

保存形式

液體

凍干粉;液體

檢測方式

熒光目視;比濁法實時濁度儀

電泳;試紙條;熒光定量

擴增產物可否用于下游應用

可否Multiplex/多重反應

缺點

氣溶膠,易產生假陽性

價格高 

上月,RPA 技術的開發(fā)公司——英國TwistDx Inc商務總監(jiān)Tony Hill來到了我公司,為我們深入介紹了RPA技術,及TwistDx的各類產品。

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Tony還與我公司的技術人員一同拜訪上海市農業(yè)科學院及上海閱爾基因技術有限公司,分別向趙凱研究員及其研究生,以及閱爾基因的研究人員介紹了RPA 技術,解答他們在使用中遇到的問題。

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 英國TwistDx公司(前身為ASM科技有限公司)成立于1999年,基于英國劍橋Babraham研究院建立的生物技術公司。該公司通過突破等溫DNA擴增,開發(fā)的重組酶聚合酶擴增技術(RPA),被譽為DNA診斷領域的革命性創(chuàng)新。

TwistDx以此技術為基礎生產的核酸擴增類產品,能在恒定且較低的溫度下,僅用10~20分鐘,進行單分子核酸檢測。這一技術對環(huán)境、硬件設施的要求很低,對于生物防護、水體檢驗、食品檢驗、醫(yī)療診斷、微流體、獸醫(yī)等方面都有良好的應用。

RPA擴增的各種體系試劑盒中,含有DNA、RNA擴增所需的所有試劑,研究者只要準備好引物和模板就行了。擴增結果可以分別通過凝膠電泳檢測、熒光定量檢測或試紙條檢測,產物純化后可用于下游研究。

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默瑞(上海)生物科技有限公司與英國TwistDx公司達成戰(zhàn)略合作,負責RPA技術及相關產品在中國大陸地區(qū)的推廣。

默瑞(上海)生物科技有限公司(Morey Biosciences ,Inc .簡稱默瑞生物)成立于2016年7月22日,于8月1日正式運營,其前身是一家具有15年代理銷售生命科學儀器的專業(yè)公司。默瑞生物以此為經營理念。默瑞擁有兩個產品部,儀器部和試劑部。

儀器部主要代理產品有:Leica顯微系統(tǒng),Merck Millipore實驗室純水超純水儀及配套耗材,Roche實時定量PCR儀、核酸純化,Beckman流式細胞儀、離心機,IKA桌面小儀器,Lonza 細胞核轉染系統(tǒng),Miele清洗機,Tecan酶標儀、液體工作站等。

試劑部主要代理產品有: TwistDx恒溫擴增試劑盒,Echelon酯類研究試劑,Jackson ImmunoResearch抗體,MTI-GlobalStem細胞轉染試劑,ChromoTek標簽抗體, Horizon Discovery測序標準品和細胞,Enzymatics二代測序酶, Biomatik公司Elisa試劑盒,BiosPacific抗體抗原,bioWORLD植物生長劑,Nanocs PEG修飾劑,Spectrumlabs透析袋,Brighter Ideas熒光蛋白,Lumiprobe熒光染料,Polysciences微球,Emfret心血管疾病研究抗體, Iduron糖胺聚糖產品,JenaBioscience分子試劑,eENZYME病毒研究工具等。

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